2021年国家药品监督管理局食品药品审核查验中心发布了《药品注册核查工作程序（试行）》等5个文件的通告（2021年第30号），经国家药品监督管理局同意自2022年1月1日起施行。根据此规定，药品注册申请受理后，国家药品监督管理局食品药品审核查验中心（CFDI）会根据药品审评中心（CDE）启动的核查任务，开展药品注册的现场核查，包括药学研制现场核查、药理毒理学研究现场核查、药物临床试验现场核查和药品注册生产现场核查等。
笔者根据《药品注册核查要点与判定原则（药物临床试验）（试行）》并结合多年的现场核查实践经验，对药物临床试验现场核查生物分析实验室部分的核查要点及关注内容进行分析总结，与大家交流分享。
根据《药品注册核查要点与判定原则（药物临床试验）（试行）》描述，现场核查的目的主要是通过对注册申报资料与临床试验的原始记录和文件的核对和/或实地确证，核查试验实施、数据记录和结果报告是否符合试验方案和药物临床试验相关法规，核实相关申报资料的真实性、一致性，同时关注受试者保护。也就是说现场核查的关注点落脚在真实性和完整性、一致性、受试者保护和对于试验设计的科学性、逻辑性与法规遵循这四点。
CFDI的药物临床实验数据核查重在真实性和完整性，对核查中发现临床试验数据真实性存在问题的申请人、临床试验机构、合同研究组织以及相关责任人员等列入黑名单，并依法查处。总结近10年、尤其是722事件之前的核查结果，暴露的普遍真实和完整性问题有：
- 分析测试系统无稽查轨迹，生物样本分析测试仪器在研究期间无稽查轨迹和工作日志
- 空白基质无合法来源，无伦理批件、知情同意、运输温控、购买发票和合同等
- 质量体系缺失：很多实验室无独立的质量管理人员（QC和QA）。很多失败的分析批次和原因结果未报告，很多实验数据缺乏实验记录或溯源性，仪器设备及操作数据管理系统未经验证等
从以上暴露的问题以及CFDI的核查重点，针对生物样本部分在CFDI的现场核查前重点关注项如下：
- 生物样本检测实验须有完整的原始记录（包括实验单位、人员、日期、条件及实验结果等），核实记录的完整和原始性
- 开启源计算机（采集原始数据的计算机）和工作站的稽查系统
- 源计算机、数据采集软件和数据管理软件应分级管理，分析人员和项目组成员无权限对计算机的系统时间、数据更改等权限
- 计算每个分析批相邻两针样品的进样间隔，用于检查所有分析批进样连续性
- 仪器信息汇总：包括所有仪器使用记录，维护记录，校准记录，冰箱等所有检测期间相关记录等等空白基质的梳理包括来源，伦理批件、知情同意、运输温控、购买发票和购买合同等；以及每个批号用途梳理
- 标准品的梳理包括寄送的快递单、温控记录、温控校准证书；标准品接收记录、标准品储存记录；标准品使用归还记录；标准品实物的确认；标准品实物标签的确认；标准品COA文件确认；标准品购买发合同和购买发票等
- 质量体系的梳理：所有项目参与人员的培训记录和个人文档的梳理，SOP的梳理等
一致性也是临床实验数据核查重点，从近10年核查结果看，暴露的普遍一致性问题有：
- 样品管理的混乱，不能追踪样品取出和归还时间、不能追踪位置、样品丢失和样品量和实际使用不一致等情况
- 生物样本分析的方法学验证原始数据与递交的方法学验证报告的不一致情况
- 核查生物样本分析中原始分析批中标准曲线回归计算回算浓度与生物分析报告的不一致性情况，以及生物样品的测定结果与生物分析报告的不一致性的情况
从以上暴露的问题以及CFDI的核查重点，针对生物样本检测部分在CFDI的现场核查前重点关注项如下：
- 对样品接收的全流程进行梳理，包括寄送的快递单、温控记录、温控校准证书；样品接收记录、样品清点记录；样品储存记录；样品使用归还记录；样品实物的确认；样品实物标签的确认等
- 梳理方法学验证计划和原始数据的一致性，以及和总结报告的一致性
- 梳理样品分析计划和检测实施过程的一致性，以及检测结果和SOP的一致性
- 数据传输文件，要找到当时传输的源文件。梳理：数据传输协议、传输文件、传输邮件、数据接收确认文件等
对于生物分析，需确认临床样品及其中心提供的样品清单等文件无受试者相关信息；实验室使用的基质信息无公开的受试者相关信息。
对于生物分析，法规遵循以及试验设计的科学性与合理性是CDE资料初审的重点也是核查重点，从近10年核查结果看，暴露的普遍性问题有：
- 内标的选择和使用，同位素内标可极大提高方法的准确性和可靠性，减少因个体基质效应差异引起的内标响应变异导致结果的异常。指导原则里明确推荐，建议使用氘代内标
- 标准曲线浓度范围不合适，所有未知样品的检测浓度低于MQC
- 测母药还是代谢物，通常母药是必须要检测，主要代谢物和活性代谢物通常也需要检测
- 冻融稳定性，短期稳定性等稳定性结果不能支持实验不同温度的需要
从以上暴露的问题以及CFDI的核查重点，针对生物样本检测部分在CFDI的现场核查前重点关注项如下：
- 内标确认，如果未使用氘代内标；着重关注方法的稳健性和重现性以及内标响应的一致性，检测结果是否出现个体差异
- 梳理样品检测浓度，分析标准曲线和质控设置是否符合法规的要求
- 所有稳定性结果的梳理，实验过程中是否有超稳定性结果；稳定性样品的配制，取用和剩余稳定性样品的标签和实物的确认
- 全血稳定性结果的梳理，全血稳定性条件和临床采样条件的一致性
针对以上暴露的问题以及CFDI的核查重点，在承接实施临床生物样本分析研究时，应确保实验室具备完善合规的质量管理及运营体系，并如实、全面记录和报告研究过程和数据。在项目现场核查准备时应对项目背景、项目实施过程、申报过程和发补过的内容等进行全面梳理。重点要梳理之前发补过的内容、调查（如有）、样品实物、中断和特殊情况分析批、实验过程全部数据是否都已申报、标准品和临床样品运输过程和使用过程的温控记录、实验室重点设备比如LC-MS/MS、离心机、冰箱等的维护记录，校准记录和使用记录等。在现场核查过程中，积极主动配合核查老师，有理、有据、如实的回答核查问题。针对未次会议上核查老师现场公布的核查发现项，需要在规定的回复期限内，对核查问题进行整改、回复，并通过邮件和邮寄的方式对相关资料进行反馈。
参考文献：
[1]关于开展药物临床试验数据自查核查工作的公告NMPA.2015年第117号
[2] 药品注册核查要点与判定原则（药物临床试验）.NMPA.2020
[3] 药品注册核查工作程序（试行）.NMPA. 2021年第30号
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